SULT2A1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423184

概要

マウスSult2a1は、細胞質スルホトランスフェラーゼであるSULT2A1をコードしており、3′-ホスホアデノシン-5′-ホスホ硫酸（PAPS）依存的に、ヒドロキシステロイドおよび胆汁酸中間体のスルホン化を触媒する酵素です。この第II相の抱合反応は、ステロイドおよびオキシステロールの生体内利用性を調節し、解毒を促進するとともに、肝臓および腸管の代謝恒常性の維持に寄与します。SULT2A1の活性は胆汁酸およびステロイドホルモンの処理経路と交差しており、FXRやPXRなどの核内受容体プログラムとの協調的な制御を介して、外来性化合物（ゼノバイオティクス）代謝にも影響し得ます。スルホン化能の変化は、マウスモデルにおける胆汁うっ滞ストレス、肝炎症、ならびに内分泌／代謝表現型の研究において重要です。

SULT2A1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSult2a1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Sult2a1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Sult2a1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SULT2A1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SULT2A1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Sult2a1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SULT2A1の機能に不可欠なSult2a1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Sult2a1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SULT2A1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSULT2A1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Sult2a1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SULT2A1 HDRプラスミド（m）および SULT2A1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSult2a1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSult2a1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。