SULT1E1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423185

概要

Sult1e1 は、細胞質に存在する第II相抱合酵素であるエストロゲン硫酸転移酵素（SULT1E1）をコードしており、エストロゲンを硫酸化して不活性でより水溶性の高いステロイド硫酸抱合体を生成します。SULT1E1 は、活性型エストロゲンと抱合型エストロゲンのバランスを調節することで、エストロゲン受容体シグナル伝達および肝臓の異物代謝経路とのクロストークに影響を与えます。これには、ステロイド恒常性、胆汁酸の処理、ならびにより広範な硫酸転移酵素ネットワークとの相互作用が含まれます。SULT1E1 活性の変化は、ホルモン依存的な転写プログラムを変動させ得るほか、肝臓や脂肪組織における代謝・炎症状態、さらに生殖生物学におけるホルモン応答性の表現型と関連づけられています。そのためマウスモデルでは、Sult1e1 は内分泌調節、代謝における性差、ならびに組織特異的なステロイドシグナル制御を研究するうえで重要です。

SULT1E1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSult1e1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Sult1e1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Sult1e1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SULT1E1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SULT1E1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Sult1e1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SULT1E1の機能に不可欠なSult1e1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Sult1e1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SULT1E1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSULT1E1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Sult1e1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SULT1E1 HDRプラスミド（m）および SULT1E1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSult1e1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSult1e1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。