SULT1C4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-417528

概要

SULT1C4は細胞質型スルホトランスフェラーゼをコードしており、3′-ホスホアデノシン-5′-ホスホ硫酸（PAPS）から硫酸基を、水酸基またはアミノ基をもつ基質へ転移させる反応を触媒します。これにより、溶解性や生物活性が変化した硫酸抱合代謝物が生成されます。この第II相抱合反応は、異物の解毒や内因性シグナル分子の調節に寄与し、レドックス恒常性、ホルモン応答性、代謝物クリアランスを制御するより広範な細胞内ネットワークとも交差します。スルホトランスフェラーゼ活性の差異は、環境化学物質や医薬品の代謝運命に影響しうるため、SULT1C4は化学物質感受性の個人差や組織特異的代謝に関する研究において重要です。さらに、硫酸抱合能の破綻は、曝露生物学の変化や疾患関連の代謝表現型と関連づけられていることが報告されており、SULT1C4は代謝を中心とした研究における機能的ノードとしての利用を支持します。

SULT1C4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSULT1C4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SULT1C4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SULT1C4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SULT1C4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SULT1C4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SULT1C4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SULT1C4の機能に不可欠なSULT1C4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SULT1C4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SULT1C4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSULT1C4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SULT1C4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SULT1C4 HDRプラスミド（h）および SULT1C4 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSULT1C4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSULT1C4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。