SULT1C2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406300

Übersicht

SULT1C2 kodiert eine zytosolische Sulfotransferase, die die Übertragung von Sulfat von 3′-Phosphoadenosin-5′-phosphosulfat (PAPS) auf Hydroxyl- und aminhaltige Substrate katalysiert, wodurch deren Polarität erhöht und die Bioverfügbarkeit moduliert wird. Als Teil des Phase-II-Stoffwechsels ist SULT1C2 an Biotransformationsprozessen von Xenobiotika und Endobiotika beteiligt, die die zelluläre Verarbeitung von Hormonen, Umweltchemikalien und Nahrungsbestandteilen beeinflussen. Seine Aktivität ist in übergeordnete Entgiftungsnetzwerke eingebunden und kann Metabolitenprofile prägen, die sich auf Reaktionen auf oxidativen Stress und den Signaltonus auswirken. Eine veränderte Sulfatierungskapazität wurde mit interindividuellen Unterschieden in der Empfindlichkeit gegenüber Chemikalien in Verbindung gebracht und im Kontext des Karzinogenstoffwechsels sowie toxikologisch relevanter Phänotypen untersucht.

Das SULT1C2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SULT1C2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SULT1C2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SULT1C2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SULT1C2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SULT1C2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SULT1C2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SULT1C2-Exone abzielen, die für die SULT1C2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SULT1C2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SULT1C2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SULT1C2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SULT1C2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SULT1C2 HDR-Plasmid (h) und SULT1C2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SULT1C2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SULT1C2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.