SULT1C1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423200

概要

Sult1c1は、細胞質型スルホトランスフェラーゼであるSULT1C1をコードしており、PAPSから硫酸基をヒドロキシ基またはアミノ基を有する基質へ転移する第II相の異物代謝酵素です。この硫酸抱合反応は一般に水溶性を高め、小分子の生理活性・輸送・クリアランスを調節することで、細胞内の化学的恒常性の形成に寄与します。マウス組織では、SULT1C1はグルクロン酸抱合やグルタチオン抱合など他の抱合経路と協調しながら、解毒および代謝シグナル伝達に関与します。スルホトランスフェラーゼ活性の変化は、化学ストレスへの感受性、内分泌かく乱化学物質の処理、ならびに炎症に関連した組織応答の違いと関連づけられており、Sult1c1は機序毒性学および代謝研究に有用な標的となります。

SULT1C1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSult1c1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Sult1c1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Sult1c1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SULT1C1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SULT1C1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Sult1c1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SULT1C1の機能に不可欠なSult1c1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Sult1c1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SULT1C1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSULT1C1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Sult1c1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SULT1C1 HDRプラスミド（m）および SULT1C1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSult1c1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSult1c1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。