SULT1A1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423199

概要

マウスSult1a1は、細胞質型スルホトランスフェラーゼであるSULT1A1をコードしている。SULT1A1は第II相の異物代謝酵素であり、3′-ホスホアデノシン-5′-ホスホ硫酸（PAPS）を硫酸基供与体として、フェノール性化合物の硫酸抱合（スルホン化）を触媒する。この反応により基質の極性が高まり、細胞内での排除、バイオアベイラビリティ、ならびに化学反応性に影響を与えるとともに、シトクロムP450による酸化や各種抱合経路を含む、より広範な解毒ネットワークと統合されている。SULT1A1活性は、食事由来成分、環境化学物質、ならびに一部のシグナル分子の肝臓および肝外組織での処理を規定し、その結果として酸化ストレス応答や代謝物依存的なシグナル伝達にも影響する。硫酸抱合能の変化は、肝臓および消化管生理に関連する疾患モデルにおいて、毒性物質感受性の個体差や炎症に伴う組織傷害の程度の違いと関連づけられている。

SULT1A1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSult1a1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Sult1a1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Sult1a1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SULT1A1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SULT1A1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Sult1a1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SULT1A1の機能に不可欠なSult1a1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Sult1a1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SULT1A1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSULT1A1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Sult1a1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SULT1A1 HDRプラスミド（m）および SULT1A1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSult1a1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSult1a1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。