Su[fu] CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-423973

概述

Suppressor of fused（Sufu）基因编码 Su(fu) 蛋白，是 Hedgehog 信号通路的关键负调控因子，可抑制 GLI 转录因子的活性，并有助于控制决定胚胎模式形成、细胞命运指定以及组织稳态的转录程序。在小鼠细胞中，SUFU 作为细胞质支架蛋白发挥作用，通过“滞留”GLI 蛋白并协调其加工处理与入核过程来实现调控，并与依赖初级纤毛的 Hedgehog 通路动态相整合。Sufu 的扰动会改变通路输出及下游基因表达，因此对于研究发育信号的调控逻辑以及 Hedgehog 驱动的细胞表型具有重要意义。在疾病相关模型中，SUFU 功能异常与 Hedgehog 信号失调有关，这也支持将其作为解析通路机制的关键节点进行研究。

Su[fu] CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Sufu基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Sufu基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Sufu开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Su[fu]蛋白表达失活。

该CRISPR敲除系统能够高效构建Sufu缺失的细胞模型，用于Su[fu]信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

主要特点

• 针对对 Su[fu] 功能至关重要的 Sufu 外显子的 sgRNA
  通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
  GFP 报告基因用于识别转染细胞
  针对多个 Sufu 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
  兼容转染递送

设计变体

CRISPRs +/- HDR

• 由 Su[fu] CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 Su[fu] CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Sufu 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
  由 Su[fu] HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 Su[fu] HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Sufu同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Sufu靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。