STARS CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406050

概要

ABRAはSTARS（striated muscle activator of Rho signaling）をコードする。STARSは心筋および骨格筋に豊富に発現するアクチン結合タンパク質で、細胞骨格ダイナミクスを転写制御へと結び付ける。STARSはRhoAシグナル伝達を促進し、SRF/MRTFによって駆動される遺伝子発現のアクチン依存的な調節を制御することで、機械的刺激や収縮に由来するシグナルを、筋形成およびストレス応答プログラムと統合する。これらの経路を介してABRAは、筋分化、肥大性リモデリング、ならびに負荷や損傷に対する細胞応答に影響を与える。STARS活性の異常は、心筋症・筋疾患に関連する転写シグネチャーと関連付けられており、ABRAは筋生物学における「細胞骨格から核」へのシグナル伝達を検討するための有用な標的である。

STARS CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるABRA遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ABRA内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ABRAのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、STARSタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、STARSシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ABRA欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• STARSの機能に不可欠なABRAエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ABRAゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• STARS CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSTARS CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ABRA遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  STARS HDRプラスミド（h）および STARS HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはABRAホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のABRA標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。