Stabilin-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406773

Descripción general

STAB1 codifica Stabilin-1, un receptor depurador (scavenger) multifuncional expresado predominantemente por células endoteliales y macrófagos activados de forma alternativa, donde favorece la endocitosis y la eliminación de diversos ligandos, incluidos lipoproteínas modificadas y material derivado de células apoptóticas. A través de sus funciones en la captación mediada por receptores, el tráfico intracelular y la adhesión celular, Stabilin-1 contribuye a la homeostasis vascular, la regulación inmunitaria y los procesos de remodelación dentro de los microambientes tisulares. La actividad de STAB1 se estudia con frecuencia en el contexto de la polarización de macrófagos y del diálogo cruzado estroma–inmunidad que moldea la señalización inflamatoria y el recambio de la matriz extracelular. La expresión desregulada de STAB1 se ha asociado con estados inflamatorios crónicos y con la biología de los macrófagos asociados a tumores, lo que ofrece un punto de entrada mecanístico para examinar las contribuciones mieloides a microambientes relevantes para la enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Stabilin-1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen STAB1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del STAB1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de STAB1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Stabilin-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en STAB1 para la investigación de la señalización de Stabilin-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de STAB1 críticos para la función de Stabilin-1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de STAB1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Stabilin-1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Stabilin-1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus STAB1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Stabilin-1 (h) y el plásmido HDR Stabilin-1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología STAB1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana STAB1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.