Plasmide Double Nickase (m) St3Gal-I: sc-422935-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) St3Gal-I correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide St3Gal-I Double Nickase (m) et le plasmide St3Gal-I Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant St3gal1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) St3Gal-I | sc-422935-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) St3Gal-I | sc-422935-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin St3gal1 code la sialyltransférase St3Gal-I, résidente de l’appareil de Golgi, qui catalyse le transfert de l’acide sialique via une liaison α2,3 sur le motif Galβ1-3GalNAc des O‑glycanes de type « core 1 », déterminant ainsi l’état de sialylation des glycoprotéines de type mucine. En modulant les structures glycaniques terminales, St3Gal-I influence la stabilité des glycoprotéines, les interactions récepteur–ligand, ainsi que les processus d’adhésion cellule–cellule ou cellule–matrice, essentiels à la régulation immunitaire et à la biologie épithéliale. Cette enzyme constitue un élément clé des voies d’O‑glycosylation qui affectent le trafic membranaire et les microenvironnements de signalisation, avec des conséquences en aval sur l’inflammation et le remodelage des glycannes associé aux tumeurs. Une activité ST3GAL1 altérée et des épitopes α2,3‑sialylés sont fréquemment étudiés dans des contextes tels que le développement des cellules immunitaires, l’adhésion liée aux métastases et les mécanismes d’échappement glyco‑immunitaire.
St3Gal-I Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus St3gal1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de St3gal1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de St3gal1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de St3gal1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.