St3Gal-I Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422935
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- St3Gal-I O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico St3Gal-I, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
St3Gal-I Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422935 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene murino St3gal1 codifica a sialiltransferase St3Gal-I, residente no Golgi, que catalisa a adição de ácido siálico ligado em α2,3 a estruturas Galβ1-3GalNAc, gerando O-glicanos do core 1 sialilados. Ao moldar o estado de sialilação de O-glicoproteínas do tipo mucina, a St3Gal-I influencia a estabilidade proteica mediada por glicanos, o engajamento de recetores e as interações célula–célula ou célula–matriz. Essa atividade contribui para processos mais amplos dependentes de glicosilação, como reconhecimento imunitário, tráfego de leucócitos e modulação da sinalização na superfície celular. Alterações na atividade da ST3GAL1 e nos padrões de sialilação de O-glicanos do core 1 têm sido associadas à inflamação e à remodelação de glicanos associada a tumores, tornando o St3gal1 um alvo útil para estudos mecanísticos de alterações de glicosilação relevantes para doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO St3Gal-I (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene St3gal1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do St3gal1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do St3gal1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína St3Gal-I.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de St3gal1 para a investigação da sinalização de St3Gal-I, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) St3gal1 críticos para a função St3Gal-I
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos St3gal1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo St3Gal-I Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo St3Gal-I Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus St3gal1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo St3Gal-I Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR St3Gal-I (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia St3gal1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo St3gal1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.