SSTR5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404199

概要

ソマトスタチン受容体5（SSTR5）はソマトスタチンのGタンパク質共役受容体であり、主にGi/oタンパク質と共役してアデニル酸シクラーゼ活性を抑制し、細胞内cAMPを低下させ、イオンチャネルシグナル伝達を調節します。MAPK/ERKをはじめとする他のGPCR制御経路への下流作用を介して、SSTR5は細胞種依存的にホルモン分泌、神経伝達、ならびに増殖プログラムに影響を及ぼします。ヒト組織では、SSTR5は内分泌および代謝の調節に寄与し、インスリンや成長ホルモン軸のシグナル伝達の調整などに関与します。ソマトスタチン受容体シグナルの異常は、複数の疾患関連状況において分泌表現型や増殖挙動の変化と関連していることが報告されており、SSTR5は経路解析のための有用なノードとなります。

SSTR5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSSTR5遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SSTR5内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SSTR5のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SSTR5タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SSTR5シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SSTR5欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SSTR5の機能に不可欠なSSTR5エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SSTR5ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SSTR5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSSTR5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SSTR5遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SSTR5 HDRプラスミド（h）および SSTR5 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSSTR5ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSSTR5標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。