SSTR1 Double Nickaseプラスミド (h): sc-403410-NIC

SSTR1はソマトスタチン受容体1をコードしており、Gi/o共役型のGPCRとしてソマトスタチンペプチドに結合し、アデニリルシクラーゼ活性を抑制してcAMP産生を低下させ、さらにMAPK/ERKやPI3Kシグナル伝達などの下流エフェクターを調節します。これらの経路を介して、SSTR1はカルシウムフラックスやイオンチャネル活性、ならびに神経興奮性、内分泌分泌、細胞周期制御を調整する転写プログラムに影響を与えます。受容体シグナルは神経内分泌系および消化管系における協調的なフィードバックに寄与し、ソマトスタチンのトーンがホルモン放出やシナプス伝達を形作ります。ソマトスタチン受容体の発現やシグナル伝達の異常は、神経内分泌分化の変化や増殖性表現型と関連づけられており、腫瘍生物学や神経／内分泌制御の研究における機序的ターゲットとしての利用を支持しています。

SSTR1 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における SSTR1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、SSTR1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、SSTR1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、SSTR1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。