SSSCA1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406804

Panoramica

SSSCA1 (autoantigene 1 della sindrome di Sjögren/sclerodermia) codifica una proteina nucleare conservata, originariamente identificata come autoantigene nelle malattie autoimmuni sistemiche. Sebbene le sue funzioni molecolari siano ancora in fase di chiarimento, le evidenze disponibili collegano SSSCA1 all’omeostasi nucleare, alle interazioni proteina–proteina e a processi sensibili allo stress cellulare che influenzano la regolazione genica e il controllo del ciclo cellulare. Un’espressione alterata o il riconoscimento immunitario di SSSCA1 sono stati riportati in contesti rilevanti per l’autoimmunità e la biologia del cancro, rendendolo un bersaglio utile per analizzare i meccanismi di regolazione nucleare aberrante. Lo studio di SSSCA1 supporta indagini a livello di via su come le proteine nucleari contribuiscano a patologie associate al sistema immunitario e a programmi di crescita deregolati.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SSSCA1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SSSCA1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SSSCA1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SSSCA1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SSSCA1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SSSCA1 per lo studio della segnalazione di SSSCA1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni SSSCA1 critici per la funzione di SSSCA1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SSSCA1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal SSSCA1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal SSSCA1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SSSCA1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal SSSCA1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR SSSCA1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SSSCA1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SSSCA1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.