SRPK1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423158

概要

マウスのSrpk1は、セリン／アルギニンに富むタンパク質特異的キナーゼ1（SRPK1）をコードしており、SRSF因子などのSRタンパク質をリン酸化することでpre-mRNAスプライシングを制御する主要な調節因子である。これにより、SRタンパク質の核内局在やスプライソソームの組み立てに影響を与える。SRPK1はシグナル入力を選択的スプライシングの決定と結び付けることで、増殖、ストレス応答、分化を司る遺伝子発現プログラムに作用する。さらにSRPK1活性は、細胞周期制御や転写後制御に関連するRNAプロセシング・ネットワークとも交差しており、がん、神経変性、炎症性環境で観察されるスプライシング異常の研究において重要である。マウス系では、SRPK1の機能攪乱は、スプライシングキナーゼのシグナルが組織特異的な転写産物アイソフォームおよび下流表現型をどのように形成するかを解明するためによく用いられる。

SRPK1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSrpk1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Srpk1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Srpk1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SRPK1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SRPK1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Srpk1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SRPK1の機能に不可欠なSrpk1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Srpk1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SRPK1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSRPK1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Srpk1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SRPK1 HDRプラスミド（m）および SRPK1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSrpk1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSrpk1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。