SREC CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406838

概要

SCARF1は、内皮細胞に発現するスカベンジャー受容体（SREC）をコードしており、修飾リポタンパク質やポリアニオン性高分子など、幅広いリガンドに結合して細胞内へ取り込むクラスFスカベンジャー受容体です。SRECは、エンドサイトーシス輸送、細胞接着、細胞外物質の除去に寄与し、血管内皮と免疫監視を恒常性維持の取り込み経路と結び付けます。リガンド認識と取り込みにおける役割を通じて、スカベンジャー受容体活性の変化が組織微小環境に影響し得る炎症、酸化ストレス応答、血管生物学などの過程でSCARF1が研究されています。スカベンジャー受容体経路の制御異常は心代謝疾患および炎症性疾患の機序に関連するとされており、SCARF1はヒトモデル系における内皮—免疫相互作用を解析するための有用な標的として位置付けられます。

SREC CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSCARF1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SCARF1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SCARF1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SRECタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SRECシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SCARF1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SRECの機能に不可欠なSCARF1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SCARF1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SREC CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSREC CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SCARF1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SREC HDRプラスミド（h）および SREC HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSCARF1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSCARF1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。