Plásmido Doble Nickase (h) SR-5A: sc-404950-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SR-5A consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SR-5A (h) y el plásmido de doble nickasa SR-5A (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HTR5A. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SR-5A | sc-404950-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) SR-5A | sc-404950-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HTR5A codifica el receptor humano 5-hidroxitriptamina 5A (SR-5A), un receptor acoplado a proteína G que transduce señales serotoninérgicas hacia vías intracelulares de segundos mensajeros. SR-5A se acopla principalmente a proteínas Gi/o para modular la actividad de la adenilato ciclasa y la señalización posterior de cAMP/PKA, con efectos más amplios sobre la excitabilidad neuronal y la transmisión sináptica. A través de su integración con redes reguladas por la serotonina, HTR5A es relevante para estudios de la función de circuitos del SNC y del control neuromodulador de la conducta. La desregulación de la señalización de receptores serotoninérgicos, incluidos cambios en la expresión y el acoplamiento de receptores 5-HT, se investiga con frecuencia en los mecanismos de enfermedades neuropsiquiátricas y del neurodesarrollo.
SR-5A El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HTR5A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HTR5A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HTR5A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HTR5A alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.