Plasmide Double Nickase (h) SR-1F: sc-405459-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SR-1F correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SR-1F Double Nickase (h) et le plasmide SR-1F Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HTR1F. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SR-1F | sc-405459-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SR-1F | sc-405459-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HTR1F code le récepteur humain 1F de la 5‑hydroxytryptamine (sérotonine), un récepteur couplé aux protéines G qui s’associe principalement à Gi/Go afin d’inhiber l’adénylate cyclase et de réduire l’AMPc intracellulaire. La signalisation de SR‑1F module la libération de neurotransmetteurs et l’excitabilité neuronale via des processus régulés par l’axe AMPc/PKA, ainsi que par des effets en aval sur l’activité des canaux ioniques et des voies associées aux MAPK. L’expression de HTR1F est enrichie dans les tissus neuronaux et contribue à la régulation des réseaux sérotoninergiques qui influencent le traitement sensoriel et la signalisation neurovasculaire. Une signalisation GPCR sérotoninergique dérégulée, y compris une altération de l’activité de la voie HTR1F, est impliquée dans des mécanismes pertinents pour des maladies neurologiques et neuropsychiatriques, tels que la biologie de la migraine et les dysfonctionnements des circuits sensoriels.
SR-1F Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HTR1F dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HTR1F. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HTR1F. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HTR1F.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.