Plasmide Double Nickase (m) Sprr1b: sc-423137-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Sprr1b correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Sprr1b Double Nickase (m) et le plasmide Sprr1b Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Sprr1b. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Sprr1b | sc-423137-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Sprr1b | sc-423137-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Sprr1b (small proline-rich protein 1B) est un précurseur murin de l’enveloppe cornée qui est réticulé par des transglutaminases lors de la différenciation terminale des kératinocytes, contribuant à la formation de la barrière épidermique et à la résistance mécanique. Son expression est induite en aval de signaux de stress épithélial et de différenciation, et il est fréquemment utilisé comme marqueur des programmes de différenciation squameuse impliquant des réponses transcriptionnelles régulées par l’EGFR/MAPK et AP-1. Au-delà de la peau, Sprr1b peut être surexprimé dans des épithéliums lésés et des tissus en régénération, reflétant des rôles dans la réparation de la barrière et l’adaptation cellulaire aux dommages. Une expression dérégulée des membres de la famille SPRR a été associée à des états cutanés hyperkératosiques et inflammatoires ainsi qu’à des contextes de remodelage épithélial, ce qui fait de Sprr1b une cible pertinente pour l’étude des dysfonctions de barrière et de la biologie du stress épithélial.
Sprr1b Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Sprr1b dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Sprr1b. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Sprr1b. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Sprr1b.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.