Sp110 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405542

Descripción general

SP110 codifica Sp110, una proteína asociada a los cuerpos nucleares implicada en la regulación de la transcripción y en el control de programas inmunitarios dependiente de la cromatina. Sp110 participa en la arquitectura nuclear e interactúa con complejos reguladores que moldean la expresión génica sensible al interferón y la expresión de genes inflamatorios, lo que la vincula a vías de defensa del huésped y a funciones asociadas a los macrófagos. Estudios genéticos y de expresión han relacionado SP110 con la susceptibilidad y la variación en fenotipos mediados por el sistema inmunitario, respaldando su uso como punto de entrada molecular para desentrañar redes de señalización de la inmunidad innata. La actividad alterada de SP110 también se aprovecha para estudiar cómo los componentes de los cuerpos nucleares influyen en el estado celular, los resultados transcripcionales y los circuitos génicos de respuesta a patógenos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Sp110 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SP110 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SP110 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SP110 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Sp110.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SP110 para la investigación de la señalización de Sp110, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SP110 críticos para la función de Sp110
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SP110 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Sp110 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Sp110 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SP110. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Sp110 (h) y el plásmido HDR Sp110 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SP110 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SP110 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.