Sp1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423094
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Sp1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Sp1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Sp1 Anticorpo (1C6): sc-420
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Sp1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423094 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Sp1 (proteína de especificidade 1) é um fator de transcrição do tipo dedo de zinco expresso de forma ubíqua, que se liga a elementos promotores ricos em GC para regular a transcrição basal e induzível em diversos programas gênicos. Em células de camundongo, o Sp1 integra sinais das vias MAPK/ERK, PI3K/AKT e de vias responsivas ao estresse para coordenar a progressão do ciclo celular, as respostas a dano no DNA, o remodelamento da cromatina e a homeostase metabólica. Por meio de interações com correpressores e coativadores como p300/CBP e complexos de HDAC, o Sp1 ajuda a moldar o resultado transcricional de genes envolvidos em proliferação, apoptose e diferenciação. A atividade desregulada de Sp1 tem sido implicada em redes transcricionais oncogênicas, sinalização inflamatória e alterações de expressão gênica associadas à neurodegeneração, tornando-o um nó-chave para estudos mecanísticos do controle transcricional.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Sp1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sp1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sp1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sp1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Sp1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sp1 para a investigação da sinalização de Sp1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sp1 críticos para a função Sp1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sp1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Sp1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Sp1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sp1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Sp1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Sp1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sp1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sp1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.