smoothelin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400923

개요

SMTN은 스무텔린(smoothelin)이라는 세포골격 단백질을 암호화하며, 완전히 분화한 평활근 세포에 선택적으로 풍부하게 존재하고 액틴 필라멘트의 조직화 및 수축 장치의 구조적 완전성과 연관됩니다. 스무텔린은 혈관 및 내장 평활근의 리모델링 과정에서 평활근 수축성, 세포 구조, 그리고 표현형 안정성의 조절에 기여합니다. SMTN의 발현 양상 변화는 평활근 분화 상태를 나타내는 표지자로 사용되며, 혈관 리모델링, 섬유화와 연관된 근섬유아세포(myofibroblast) 전이, 혈관 긴장도의 변화와 같은 과정에 관여하는 것으로 알려져 있습니다. 계통(lineage) 제한적인 세포골격 구성요소로서 SMTN은 평활근 성숙을 조절하는 기전, 기계적 신호전달(mechanotransduction), 그리고 세포골격 신호 네트워크를 연구하는 데 중요한 표적입니다.

smoothelin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SMTN 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SMTN 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SMTN의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 smoothelin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 smoothelin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SMTN 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• smoothelin 기능에 중요한 SMTN 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SMTN 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• smoothelin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 smoothelin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SMTN 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  smoothelin HDR 플라스미드 (h) 및 smoothelin HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SMTN 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SMTN 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.