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| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SMG5 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h) | sc-406989-LAC | 200 µl | $455.00 |
SMG5 codifica um componente central da maquinaria de degradação de mRNA mediada por nonsense (NMD), que promove a vigilância e a eliminação de transcritos contendo códons de terminação prematuros. SMG5 coopera com SMG6 e SMG7 a jusante da fosforilação de UPF1 para recrutar complexos de fosfatases proteicas e facilitar a desfosforilação de UPF1, acoplando a terminação da tradução à degradação do mRNA. Por meio desse papel, SMG5 ajuda a manter o controle de qualidade do RNA, molda a homeostase do transcriptoma e influencia respostas ao estresse celular e a programas de diferenciação. A desregulação da NMD e alterações na função de SMG5 têm sido associadas a redes de expressão gênica aberrantes implicadas na biologia do câncer e em mecanismos de doenças do neurodesenvolvimento e neurodegenerativas, tornando SMG5 um ponto útil para a investigação de vias.
As Partículas de Ativação Lentivirais SMG5 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de SMG5 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais SMG5 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição SMG5, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de SMG5. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo SMG5 e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.