非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Smad6 抗体 (D-4): sc-25321. 非转染: sc-117752 (A) 和小鼠 Smad6 转染: sc-123643 (B) 293T 全细胞裂解液中 Smad6 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
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Smad6 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-421529
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Smad6 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Smad6基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Smad6: sc-25321，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Smad6 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-421529 | 20 µg | $397.00 |
概述
SMAD6 是一种抑制性 SMAD，可通过干扰受体调控型 SMAD 的磷酸化及其复合体形成，从而减弱 BMP 受体下游的信号传导，并在某些情境下也抑制 TGF-β 受体下游信号。在小鼠细胞中，Smad6 有助于精细调控由 BMP 驱动的转录程序，这些程序支配发育模式建立、成骨与成软骨分化以及血管稳态。通过调节经典的 SMAD 信号通路，SMAD6 参与控制细胞外基质重塑、细胞命运决定，以及形态发生因子通路的反馈调节。Smad6 活性失调与 BMP 通路输出异常及与先天性心血管和骨骼生物学相关的表型有关，因此它是开展通路“制动/约束”机制研究的一个有用关键节点。
Smad6 CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Smad6基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Smad6基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Smad6开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Smad6蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Smad6缺失的细胞模型，用于Smad6信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Smad6 功能至关重要的 Smad6 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Smad6 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Smad6 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 Smad6 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Smad6 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Smad6 HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 Smad6 HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Smad6同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Smad6靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。