SLUG Lentiviral Activation Particles (h): sc-400389-LAC

Das humane SNAI2-Gen kodiert den Zinkfinger-Transkriptionsfaktor SLUG, einen zentralen Regulator der epithelial–mesenchymalen Transition (EMT), der epitheliale Genprogramme reprimiert und Motilität, invasionsassoziierte Phänotypen sowie das Überleben unter Stress fördert. SLUG integriert Signale aus Entwicklungs- und Stressantwortwegen, darunter TGF-β, WNT/β-Catenin, NOTCH, RTK/MAPK und hypoxieabhängige Netzwerke, um Transkriptionszustände und Zellschicksalsentscheidungen umzuprogrammieren. Seine Aktivität beeinflusst das Zytoskelett-Remodeling, Adhäsionsdynamiken und Linienplastizität; eine veränderte Regulation von SNAI2 wird häufig im Kontext von Tumorprogression, Metastasierungsbiologie und Mechanismen der Therapieresistenz untersucht. SLUG spielt zudem eine Rolle im Verhalten von Stamm-/Vorläuferzellen und in Differenzierungsprogrammen, was es für Modelle des Gewebeumbaus und mikroenvironmentgetriebener phänotypischer Umschaltung relevant macht.

SLUG Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente SNAI2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

SLUG Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der SNAI2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen SLUG-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen SNAI2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.