SLIRP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-418350

Visão geral

SLIRP (proteína de ligação a RNA que interage com hastes-alças do SRA) é um pequeno fator mitocondrial de ligação a RNA que se associa à LRPPRC para estabilizar e coordenar o processamento pós-transcricional de mRNAs codificados pela mitocôndria. Ao sustentar a homeostase dos transcritos mitocondriais, SLIRP contribui para a capacidade de fosforilação oxidativa (OXPHOS) e para a função da cadeia respiratória, influenciando o metabolismo energético celular e as respostas ao estresse mitocondrial. A perturbação de SLIRP pode desorganizar programas de expressão gênica mitocondrial e tem sido associada a fenótipos de disfunção mitocondrial relevantes para mecanismos de doenças neuromusculares e metabólicas. Assim, SLIRP é estudada em vias que conectam a regulação de RNA mitocondrial, a proteostase e a adaptação bioenergética.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SLIRP (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SLIRP em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SLIRP, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SLIRP na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SLIRP.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SLIRP para a investigação da sinalização de SLIRP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SLIRP críticos para a função SLIRP
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SLIRP para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SLIRP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SLIRP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SLIRP. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SLIRP Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SLIRP (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SLIRP para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SLIRP definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.