SLC35F2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406765

概要

SLC35F2は、細胞内膜に局在する多回膜貫通型トランスポーターと予測されるタンパク質をコードしており、小分子の細胞内取り込みや区画内分布に影響する溶質輸送（トラフィッキング）に関与することを支持するエビデンスが示されています。SLC35ファミリーの一員として、SLC35F2は代謝恒常性、オルガネラ機能、ならびに細胞ストレス応答に影響し得る膜輸送過程と関連しています。トランスポーター活性の変化は、外来性化合物（ゼノバイオティクス）や内因性代謝物への細胞内曝露を調節し得るため、SLC35F2は薬理学およびがん細胞生物学に関連する機構とも結び付けられます。そのため、SLC35F2は、輸送依存的な感受性、細胞フィットネス、ならびに化合物応答を規定する経路レベルの決定因子に関する研究で、しばしば解析対象となっています。

SLC35F2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSLC35F2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SLC35F2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SLC35F2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SLC35F2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SLC35F2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SLC35F2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SLC35F2の機能に不可欠なSLC35F2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SLC35F2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SLC35F2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSLC35F2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SLC35F2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SLC35F2 HDRプラスミド（h）および SLC35F2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSLC35F2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSLC35F2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。