Plasmide Double Nickase (h) SLC35C1: sc-410008-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SLC35C1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SLC35C1 Double Nickase (h) et le plasmide SLC35C1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SLC35C1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SLC35C1 | sc-410008-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SLC35C1 | sc-410008-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC35C1 code le transporteur de GDP‑L‑fucose localisé dans l’appareil de Golgi, qui fournit du fucose activé aux glycosyltransférases luminales, permettant la fucosylation du cœur des N‑glycanes et la fucosylation des ligands des sélectines. En contrôlant la capacité de fucosylation cellulaire, SLC35C1 influence l’adhésion et le trafic des leucocytes, la reconnaissance cellule–cellule, ainsi que, plus largement, la signalisation dépendante des glycannes dans les voies sécrétoires et endocytaires. Des variants à perte de fonction sont associés à des troubles congénitaux de la glycosylation caractérisés par une fucosylation défectueuse et un dysfonctionnement immunologique, faisant de SLC35C1 un nœud central pour l’étude de la régulation du glycôme. La perturbation de SLC35C1 est donc largement utilisée pour analyser comment le transport des sucres nucléotidiques façonne l’adhérence, la signalisation liée à l’inflammation et la maturation des glycoprotéines dans les cellules humaines.
SLC35C1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SLC35C1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SLC35C1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SLC35C1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SLC35C1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.