Plasmide Double Nickase (h) SLC35A3: sc-417814-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SLC35A3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SLC35A3 Double Nickase (h) et le plasmide SLC35A3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SLC35A3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SLC35A3 | sc-417814-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SLC35A3 | sc-417814-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC35A3 code un transporteur de sucres nucléotidiques associé à l’appareil de Golgi et au réticulum endoplasmique (RE), qui importe l’UDP‑N‑acétylglucosamine (UDP‑GlcNAc) dans la lumière afin de soutenir la glycosylation N‑liée, la glycosylation O‑liée et la biosynthèse des glycolipides. En contrôlant la disponibilité des substrats pour les glycosyltransférases, SLC35A3 influence le repliement des protéines, leur trafic intracellulaire et la composition des glycannes à la surface cellulaire, lesquels modulent la signalisation des récepteurs et les interactions cellule–cellule. Une perturbation du transport de l’UDP‑GlcNAc peut dérégler la protéostasie et les voies dépendantes des glycannes, reliant SLC35A3 aux troubles congénitaux de la glycosylation ainsi qu’à des phénotypes plus larges touchant le neurodéveloppement et l’homéostasie métabolique. Son rôle central dans l’axe hexosamine/glycosylation en fait également une cible pertinente pour étudier comment la détection des nutriments s’articule avec le remodelage des glycannes dans les cellules humaines.
SLC35A3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SLC35A3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SLC35A3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SLC35A3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SLC35A3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.