SLC25A36 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-412475

概要

SLC25A36は、ミトコンドリア内膜に存在する溶質キャリアをコードしており、ヌクレオチドトランスポーターとして機能して、細胞質とミトコンドリアマトリックス間でピリミジンヌクレオチドの交換を担います。ミトコンドリア内のdNTP利用可能性を維持することで、SLC25A36はミトコンドリアDNA（mtDNA）の複製と修復、酸化的リン酸化能、さらに広範なミトコンドリア恒常性に寄与します。ヌクレオチド輸送の撹乱は、ミトコンドリア機能障害をエネルギー代謝、レドックスバランス、複製ストレスの変化と結び付け得るため、神経変性、炎症シグナル伝達、腫瘍生物学で頻繁に研究されるプロセスに関連します。ミトコンドリアキャリアファミリーの一員として、SLC25A36はオルガネラ生合成、ストレス応答、代謝適応の文脈で一般的に研究されています。

SLC25A36 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSLC25A36遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SLC25A36内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SLC25A36のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SLC25A36タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SLC25A36シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SLC25A36欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SLC25A36の機能に不可欠なSLC25A36エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SLC25A36ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SLC25A36 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSLC25A36 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SLC25A36遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SLC25A36 HDRプラスミド（h）および SLC25A36 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSLC25A36ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSLC25A36標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。