SLC25A36 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412475

Visão geral

SLC25A36 codifica um transportador de solutos da membrana interna mitocondrial que atua como transportador de nucleótidos, apoiando a troca de nucleótidos de pirimidina entre o citosol e a matriz mitocondrial. Ao manter a disponibilidade intramitocondrial de dNTPs, o SLC25A36 contribui para a replicação e a reparação do DNA mitocondrial, para a capacidade de fosforilação oxidativa e para uma homeostase mitocondrial mais ampla. Perturbações no transporte de nucleótidos podem ligar a disfunção mitocondrial a alterações no metabolismo energético, no equilíbrio redox e a stress replicativo, processos frequentemente investigados na neurodegeneração, na sinalização inflamatória e na biologia tumoral. Como membro da família de transportadores mitocondriais, o SLC25A36 é frequentemente estudado no contexto da biogénese de organelos, respostas ao stress e adaptação metabólica.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SLC25A36 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SLC25A36 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SLC25A36, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SLC25A36 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SLC25A36.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SLC25A36 para a investigação da sinalização de SLC25A36, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SLC25A36 críticos para a função SLC25A36
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SLC25A36 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SLC25A36 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SLC25A36 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SLC25A36. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SLC25A36 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SLC25A36 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SLC25A36 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SLC25A36 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.