Plasmide Double Nickase (h) SLC25A20: sc-407585-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SLC25A20 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SLC25A20 Double Nickase (h) et le plasmide SLC25A20 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SLC25A20. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SLC25A20 | sc-407585-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SLC25A20 | sc-407585-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC25A20 code la translocase carnitine–acylcarnitine (CACT), un transporteur de la membrane interne mitochondriale qui échange des acylcarnitines contre de la carnitine libre afin de permettre l’importation des acides gras à longue chaîne en vue de leur β-oxydation. Cette étape de transport relie la navette de la carnitine au métabolisme énergétique mitochondrial et soutient la production d’ATP à partir de substrats lipidiques, en particulier dans les tissus à forte demande énergétique. Une perturbation de SLC25A20 dérègle l’oxydation des acides gras et peut modifier les profils d’acylcarnitines, l’équilibre rédox et la signalisation métabolique en aval. Des variants de SLC25A20 sont associés à des erreurs innées du métabolisme impliquant une utilisation déficiente des acides gras à longue chaîne, ce qui en fait une cible utile pour étudier le transport mitochondrial, les réponses au stress métabolique et les réseaux de catabolisme des lipides.
SLC25A20 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SLC25A20 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SLC25A20. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SLC25A20. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SLC25A20.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.