Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) SIRT6: sc-412216-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SIRT6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SIRT6 Double Nickase (h) et le plasmide SIRT6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SIRT6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SIRT6 Antibody (2G1H1): sc-517196
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SIRT6 | sc-412216-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SIRT6 | sc-412216-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SIRT6 code une désacylase/ADP‑ribosyltransférase nucléaire dépendante du NAD+ qui module la structure de la chromatine et la transcription en désacétylant des substrats histoniques tels que H3K9ac et H3K56ac. Elle fonctionne à l’interface entre la signalisation des dommages à l’ADN et le maintien du génome, en favorisant la réparation des cassures double brin, l’intégrité des télomères et la tolérance au stress de réplication. SIRT6 régule également des réseaux de gènes métaboliques via des interactions avec des facteurs dont NF‑κB et HIF‑1α, reliant l’état de la chromatine à l’inflammation et à la programmation glycolytique. Une activité de SIRT6 dérégulée a été associée à des processus pertinents pour la biologie du vieillissement, les dysfonctions métaboliques, la neurodégénérescence et l’instabilité génomique liée au cancer, ce qui en fait un nœud utile pour des études mécanistiques.
SIRT6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SIRT6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SIRT6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SIRT6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SIRT6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.