shrew-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406228

Visão geral

AJAP1 codifica a shrew-1, uma proteína transmembranar de passagem única implicada em interações célula–célula e célula–matriz na membrana plasmática e na polaridade epitelial. Funções descritas associam a shrew-1 à modulação da organização do citoesqueleto, do tráfego de membrana e de vias de sinalização ligadas à adesão que influenciam a migração celular e a arquitetura dos tecidos. Em biologia humana, alterações na expressão de AJAP1 têm sido associadas a mudanças no comportamento invasivo e à remodelação da dinâmica das junções aderentes, sustentando seu uso como marcador de transições no estado de adesão. Essas características tornam AJAP1/shrew-1 relevante para estudos mecanísticos de redes supressoras de tumor, fenótipos relacionados à metástase e sinalização dependente do microambiente.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO shrew-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene AJAP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do AJAP1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do AJAP1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína shrew-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de AJAP1 para a investigação da sinalização de shrew-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) AJAP1 críticos para a função shrew-1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos AJAP1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo shrew-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo shrew-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus AJAP1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo shrew-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR shrew-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia AJAP1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo AJAP1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.