Partículas Lentivirales de Activación (m) serum reponse factor /SRF: sc-423154-LAC
- Especies Diana: mouse
- 200 µl de Partículas Lentivirales de Activación CRISPR/dCas listas para usar
- Partículas Lentivirales de Acitvación (m) serum reponse factor /SRF es un sistema de activación de la trascripción por mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen determinado a través de la tranducción lentiviral de las células
- Partículas Lentivirales de Acitvación (m) serum reponse factor /SRF incluyen los siguientes elementos activadores SAM: plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada, (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y un plásmido que codifica la secuencia de diana específica de 20 nt de ARN. También contienen genes de resistencia a blasticidina, higromicina y puromicina.
- El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación génica
- Los gRNA codificados por el serum reponse factor /SRF Plásmido de activación lentiviral (m) y el serum reponse factor /SRF Plásmido de activación lentiviral (m2) se dirigen a regiones reguladoras distintas del promotor Srf. Puede que haya uno o ambos diseños disponibles
- Tras la transfección, la eficacia de la activación génica puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: serum reponse factor /SRF Anticuerpo (A-11): sc-25290
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Partículas Lentivirales de Activación (m) serum reponse factor /SRF | sc-423154-LAC | 200 µl | $455.00 |
El gen **Srf** de ratón codifica el *serum response factor* (SRF), un factor de transcripción con dominio MADS-box que se une a elementos de respuesta al suero para coordinar la expresión de genes de respuesta inmediata con la dinámica del citoesqueleto. SRF integra señales procedentes de la remodelación de actina mediada por RhoA y de las vías MAPK/ERK para regular programas que controlan la proliferación, la migración, la diferenciación y las respuestas al estrés. Mediante interacciones con cofactores como myocardin y las MRTF, SRF modula redes génicas del músculo liso y del corazón, así como la transcripción neuronal dependiente de la actividad. La desregulación de la señalización de SRF se ha asociado con fenotipos anómalos de remodelación y crecimiento en contextos cardiovasculares y neuromusculares, lo que lo convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos del control transcripcional en vías relevantes para la enfermedad.
Las partículas de activación lentiviral serum reponse factor /SRF (m) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de Srf en una gama más amplia de tipos de células humanas.
Las partículas de activación lentiviral serum reponse factor /SRF (m) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción Srf, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de serum reponse factor /SRF. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo Srf y la arquitectura reguladora.
El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.