SerpinB6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-417434

概要

SERPINB6はSerpinB6をコードしており、SerpinB6は細胞内に存在するクレードBのセリンプロテアーゼ阻害因子で、異常なプロテアーゼ活性を中和し、プロテオリシスに起因する細胞損傷を抑えることで細胞保護に寄与します。SerpinB6は細胞質および核内でセリンプロテアーゼの働きを制御することで、プロテオスタシスやストレス応答過程を支え、細胞の生存、分化、炎症シグナル伝達に影響を及ぼします。SERPINB6の発現は、プロテアーゼ—抗プロテアーゼのバランスがバリア機能や組織恒常性を左右する上皮系や免疫系の状況で特に重要です。セルピン活性の破綻は、プロテオトキシックストレスに対する感受性の変化や炎症性病態と関連づけられており、SERPINB6は細胞内プロテアーゼ制御の機序研究に有用な標的となります。

SerpinB6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSERPINB6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SERPINB6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SERPINB6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SerpinB6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SerpinB6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SERPINB6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SerpinB6の機能に不可欠なSERPINB6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SERPINB6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SerpinB6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSerpinB6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SERPINB6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SerpinB6 HDRプラスミド（h）および SerpinB6 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSERPINB6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSERPINB6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。