Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
SENP3 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-403747
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SENP3 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico SENP3, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SENP3 Antibody (E-7): sc-137219
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SENP3 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-403747 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
SENP3 codifica una proteasi specifica per SUMO che deconiuga preferenzialmente SUMO2/3 dalle proteine bersaglio, modulando la dinamica della SUMOilazione reversibile. SENP3 si localizza prevalentemente nel nucleolo e partecipa alla biogenesi dei ribosomi, all’omeostasi nucleolare e alla regolazione di programmi trascrizionali legati alle risposte cellulari allo stress. Attraverso la modulazione di interazioni proteiche dipendenti da SUMO, SENP3 influenza processi quali la segnalazione del danno al DNA, il controllo del ciclo cellulare e la regolazione associata alla cromatina. Un’attività di SENP3 deregolata e uno squilibrio della via di SUMO sono stati associati ad alterazioni della segnalazione proliferativa e a difetti di mantenimento del genoma rilevanti per la biologia del cancro e per altre patologie correlate allo stress.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SENP3 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SENP3 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SENP3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SENP3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SENP3.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SENP3 per lo studio della segnalazione di SENP3, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni SENP3 critici per la funzione di SENP3
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SENP3 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal SENP3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal SENP3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SENP3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal SENP3 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR SENP3 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SENP3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SENP3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.