SENP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-429217

概要

Senp2は、sentrin/SUMO特異的プロテアーゼ2（SENP2）をコードしており、SUMO修飾を除去（deSUMOylation）することでSUMOの結合を可逆的に戻し、タンパク質の安定性、細胞内局在、転写プログラムを制御する酵素です。SENP2の活性は、細胞周期の進行、DNA損傷応答、核内輸送に対するSUMO依存的な制御を形成し、NF-κBやp53に関連するストレス経路などのシグナル伝達の要所にも影響します。マウス系では、Senp2は発生および心血管系の表現型と関連づけられており、炎症、代謝制御、細胞恒常性への影響という観点からもしばしば研究されています。SUMOプロテアーゼ機能の異常は、プロテオスタシスやクロマチン関連プロセスを撹乱し、疾患モデル化や経路解析において重要となり得ます。

SENP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSenp2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Senp2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Senp2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SENP2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SENP2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Senp2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SENP2の機能に不可欠なSenp2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Senp2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SENP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSENP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Senp2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SENP2 HDRプラスミド（m）および SENP2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSenp2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSenp2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。