Plásmido Doble Nickase (m) SEMA7A: sc-422890-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)SEMA7A consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SEMA7A (m) y el plásmido de doble nickasa SEMA7A (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Sema7a. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SEMA7A Anticuerpo (C-6): sc-374432
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) SEMA7A | sc-422890-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen **Sema7a** del ratón codifica la semaforina 7A (SEMA7A), una proteína de guía e inmunomoduladora anclada a glicosilfosfatidilinositol (GPI) que regula la adhesión celular, la migración y el crecimiento de neuritas. SEMA7A señaliza a través de integrinas como ITGA1/ITGB1 y puede influir en la dinámica de las adhesiones focales, las vías MAPK y la remodelación del citoesqueleto, conectando señales extracelulares con el movimiento direccional y el patrón tisular. En contextos inmunitarios y estromales, SEMA7A contribuye al tráfico leucocitario y a la señalización inflamatoria, y su expresión alterada se ha asociado con neuroinflamación, remodelado fibrótico y la biología del microambiente tumoral. Estas funciones hacen de Sema7a una diana útil para diseccionar las vías que controlan la guía axonal, la activación de células inmunitarias y la motilidad celular impulsada por el microambiente en modelos murinos.
SEMA7A El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Sema7a en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Sema7a. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Sema7a. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Sema7a alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.