Plásmido Doble Nickase (m) SEMA6D: sc-431980-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)SEMA6D consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SEMA6D (m) y el plásmido de doble nickasa SEMA6D (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Sema6d. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SEMA6D Anticuerpo (A-8): sc-393258
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) SEMA6D | sc-431980-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) SEMA6D | sc-431980-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Sema6d codifica la semaforina murina SEMA6D, una señal de guía transmembrana que transmite señales a través de receptores plexina para regular la comunicación célula–célula dependiente de contacto. SEMA6D modula la remodelación del citoesqueleto, la migración direccional y la orientación axonal, vinculando la señalización semaforina–plexina con la actividad de las GTPasas de la familia Rho y la dinámica de actina aguas abajo. Además del patrón neural, SEMA6D contribuye a la morfogénesis tisular y a procesos vasculares e inmunitarios en los que las vías de guía determinan el posicionamiento celular. La señalización de semaforinas desregulada, incluidos cambios en la expresión de Sema6d, se utiliza para investigar mecanismos de inervación aberrante, tráfico de células inflamatorias y remodelación del microambiente en modelos relevantes para enfermedades.
SEMA6D El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Sema6d en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Sema6d. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Sema6d. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Sema6d alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.