SEMA4B CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-422881

概要

Sema4b は膜貫通型のガイダンス因子 SEMA4B をコードしており、SEMA4B はクラス4セマフォリンとして、細胞接触依存的なシグナル伝達に関与し、細胞接着、移動、ならびに細胞骨格の再構築を制御します。マウス組織では、SEMA4B は軸索誘導やシナプス構築に寄与し、炎症や損傷に関連する刺激に対するグリアおよびニューロンの応答にも関与することが示唆されています。セマフォリンシグナルは、RhoファミリーGTPアーゼを制御する経路や受容体関連キナーゼのカスケードと交差し、方向性のある運動性や組織パターニングを形作ります。SEMA4B関連シグナルを含むセマフォリンネットワークの破綻は、神経発達の異常、神経炎症、ならびにガイダンスシグナルが浸潤や免疫細胞の配置に影響する腫瘍―微小環境相互作用といった文脈で研究されています。

SEMA4B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSema4b遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Sema4b内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Sema4bのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SEMA4Bタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SEMA4Bシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Sema4b欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SEMA4Bの機能に不可欠なSema4bエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Sema4bゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SEMA4B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSEMA4B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Sema4b遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SEMA4B HDRプラスミド（m）および SEMA4B HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSema4bホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSema4b標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。