Scratch1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-410173

Visão geral

O SCRT1 codifica a proteína Scratch1, um fator de transcrição do tipo dedo de zinco que atua predominantemente como represssor transcricional em linhagens neurais, ajudando a coordenar programas de diferenciação, migração e maturação neuronal. Scratch1 funciona em redes regulatórias gênicas que se intersectam com fatores proneurais do tipo bHLH e com o controle transcricional relacionado à transição epitélio-mesênquima (EMT), moldando transições de estado celular e a dinâmica do citoesqueleto durante o desenvolvimento. Ao modular a expressão gênica específica de linhagem e reprimir programas não neuronais, o SCRT1 contribui para a manutenção da identidade neuronal e para o controle, dependente do contexto, da proliferação. Programas transcricionais associados ao SCRT1 desregulados têm sido investigados em fenótipos do neurodesenvolvimento e na biologia do câncer, em que reguladores do desenvolvimento são frequentemente reaproveitados para influenciar o estado de diferenciação e a invasividade.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Scratch1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SCRT1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SCRT1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SCRT1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Scratch1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SCRT1 para a investigação da sinalização de Scratch1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SCRT1 críticos para a função Scratch1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SCRT1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Scratch1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Scratch1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SCRT1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Scratch1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Scratch1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SCRT1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SCRT1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.