Plásmido Doble Nickase (h) Scn4b: sc-411001-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Scn4b consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Scn4b (h) y el plásmido de doble nickasa Scn4b (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SCN4B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Scn4b | sc-411001-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Scn4b | sc-411001-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SCN4B codifica la subunidad β4 del canal de sodio (Scn4b), una proteína auxiliar de membrana que se asocia con las subunidades α de los canales de sodio dependientes de voltaje para influir en la compuerta del canal, su expresión en la superficie celular y la excitabilidad. Además de modular el disparo de potenciales de acción, SCN4B se ha vinculado con la regulación de la adhesión celular y la señalización mediante interacciones en la membrana plasmática que pueden afectar la organización del citoesqueleto y la composición de los microdominios de membrana. La alteración de la expresión de SCN4B o la presencia de variantes se estudia en el contexto de trastornos relacionados con la excitabilidad y de la desregulación de la señalización eléctrica, incluidos fenotipos cardíacos y neuromusculares. En biología del cáncer, SCN4B también se ha investigado como modulador de programas de migración e invasión, lo que lo hace relevante para vías que gobiernan la transición epitelio-mesenquimatosa y el comportamiento metastásico.
Scn4b El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SCN4B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SCN4B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SCN4B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SCN4B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.