SCCA1/2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-418018

概要

SERPINB4 は扁平上皮癌抗原 1/2（SCCA1/2）をコードしており、これはクレードBに属するセリンプロテアーゼ阻害因子として、特定のカテプシンおよび関連プロテアーゼを阻害することで細胞内タンパク質分解を調節します。プロテアーゼによるタンパク質代謝回転や炎症性プロテアーゼ活性を抑制することにより、SCCA1/2 は上皮の分化、バリア機能に関連するストレス応答、ならびにサイトカイン連動のシグナル伝達プログラムに影響を及ぼします。SERPINB4 の発現変動は、扁平上皮や炎症性微小環境で報告されており、腫瘍生物学や慢性炎症の研究におけるバイオマーカーとして利用されています。SERPINB4 の機能解析は、プロテアーゼ—抗プロテアーゼのバランス、ストレス下での細胞生存、上皮系と免疫系経路のクロストークに関する機序研究を支えます。

SCCA1/2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSERPINB4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SERPINB4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SERPINB4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SCCA1/2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SCCA1/2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SERPINB4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SCCA1/2の機能に不可欠なSERPINB4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SERPINB4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SCCA1/2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSCCA1/2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SERPINB4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SCCA1/2 HDRプラスミド（h）および SCCA1/2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSERPINB4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSERPINB4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。