Plasmide Double Nickase (h) SCAP: sc-401474-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SCAP correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SCAP Double Nickase (h) et le plasmide SCAP Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SCAP. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SCAP | sc-401474-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SCAP | sc-401474-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SCAP (chaperon de SREBF) est une protéine membranaire du réticulum endoplasmique qui escorte les facteurs de transcription SREBP du RE vers l’appareil de Golgi en réponse à une diminution des stérols, permettant leur activation protéolytique et la transcription nucléaire de gènes du métabolisme lipidique. Par son interaction avec les protéines INSIG, SCAP assure un contrôle par rétroaction de la biosynthèse du cholestérol et des acides gras et coordonne l’homéostasie lipidique cellulaire avec la biogenèse membranaire. Cet axe SCAP–SREBP influence les réponses au stress du RE, le métabolisme des lipoprotéines et la reprogrammation métabolique, faisant de SCAP un nœud clé pour étudier la biologie liée aux dyslipidémies et la signalisation de croissance dépendante des lipides dans les cellules humaines. Une activité SCAP/SREBP altérée est fréquemment étudiée dans des contextes tels que la stéatose hépatique, la gestion des lipides pertinente pour l’athérosclérose et la lipogenèse associée au cancer.
SCAP Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SCAP dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SCAP. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SCAP. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SCAP.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.