SASH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403567
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SASH1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SASH1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SASH1 Anticorpo (X1): sc-517001
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SASH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403567 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SASH1 (proteína contendo domínios SAM e SH3 1) codifica uma proteína adaptadora/andaime que integra a sinalização por meio de módulos de interação SAM e SH3 para coordenar a organização do citoesqueleto, a adesão celular e o comportamento migratório. Ela tem sido associada à regulação de MAPK/ERK e de outras vias conduzidas por quinases, que moldam a integridade epitelial, as respostas ao estresse e as decisões de destino celular. Alterações na expressão ou na função de SASH1 foram relatadas em múltiplos tipos de câncer e são frequentemente estudadas no contexto de invasão, fenótipos associados à metástase e redes de sinalização com características de supressor tumoral. SASH1 também é de interesse na biologia vascular e inflamatória, em que a sinalização mediada por proteínas adaptadoras pode influenciar a função endotelial e as propriedades de barreira.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SASH1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SASH1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SASH1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SASH1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SASH1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SASH1 para a investigação da sinalização de SASH1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SASH1 críticos para a função SASH1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SASH1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SASH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SASH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SASH1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SASH1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SASH1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SASH1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SASH1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.