SASH1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403567

概要

SASH1（SAM and SH3 domain containing 1）は、SAM および SH3 の相互作用モジュールを介したシグナル伝達を統合し、細胞骨格の構築、細胞接着、ならびに細胞の遊走挙動を協調的に制御するアダプター／足場タンパク質をコードします。SASH1 は、上皮の恒常性、ストレス応答、細胞運命決定を形作る MAPK/ERK をはじめとする各種キナーゼ依存性経路の制御に関与することが示されています。SASH1 の発現量や機能の変化は複数のがん種で報告されており、浸潤や転移関連表現型、腫瘍抑制因子様のシグナル伝達ネットワークとの関連でしばしば研究されています。さらに、アダプターを介したシグナル伝達が内皮機能やバリア特性に影響し得ることから、血管生物学や炎症生物学の分野でも注目されています。

SASH1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSASH1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SASH1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SASH1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SASH1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SASH1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SASH1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SASH1の機能に不可欠なSASH1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SASH1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SASH1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSASH1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SASH1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SASH1 HDRプラスミド（h）および SASH1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSASH1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSASH1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。