SAPK4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400423

概要

MAPK13はストレス活性化プロテインキナーゼ4（SAPK4）をコードしている。SAPK4はp38 MAPKファミリーに属するセリン／スレオニンキナーゼで、炎症や環境ストレスのシグナルを転写レベルおよび転写後レベルの応答へと伝達する。SAPK4は、下流エフェクターのリン酸化を介して、サイトカイン関連シグナル伝達、細胞分化プログラムの調節、ならびに状況依存的なアポトーシスと増殖の制御に寄与する。より広範なMAPKネットワークの一部として、MAPK13/SAPK4は自然免疫応答や上皮の生物学的特性を形成する経路と相互に連関している。MAPK13の活性を含むp38 MAPKシグナルの破綻は、炎症性の病態生理やがん関連プロセスとの関連が報告されており、ストレスシグナル伝達の機序研究における有用な解析ノードとなっている。

SAPK4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMAPK13遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MAPK13内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MAPK13のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SAPK4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SAPK4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MAPK13欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SAPK4の機能に不可欠なMAPK13エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MAPK13ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SAPK4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSAPK4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MAPK13遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SAPK4 HDRプラスミド（h）および SAPK4 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMAPK13ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMAPK13標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。