Plásmido Doble Nickase (h) SAP 30L: sc-410126-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SAP 30L consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SAP 30L (h) y el plásmido de doble nickasa SAP 30L (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SAP30L. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SAP 30L | sc-410126-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) SAP 30L | sc-410126-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SAP30L (SAP 30-like) codifica un componente de los complejos correpresores Sin3A/HDAC, que acoplan factores de transcripción específicos de secuencia con la desacetilación de histonas y la compactación de la cromatina. A través de estas interacciones, SAP30L contribuye a regular programas de represión transcripcional implicados en el control del ciclo celular, la diferenciación y las respuestas al estrés celular. La regulación alterada de la remodelación de la cromatina dependiente de HDAC y de los complejos asociados a Sin3 se ha vinculado con la desregulación transcripcional generalizada observada en el cáncer y otras enfermedades en las que el control epigenético está perturbado. En consecuencia, SAP30L resulta de interés para dilucidar cómo los complejos represores modelan las redes de expresión génica y los estados de la cromatina en células humanas.
SAP 30L El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SAP30L en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SAP30L. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SAP30L. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SAP30L alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.