SAMD4A CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406449

概要

SAMD4A（sterile alpha motif domain containing 4A）はRNA結合性の制御タンパク質で、標的mRNA上の特定モチーフを認識することで、転写後段階における遺伝子発現制御に関与します。SAMD4AはmRNAの安定性、局在、翻訳抑制に関わり、その活性は細胞状態の遷移や、プロテオームを再構築するストレス適応プログラムと結び付けられています。これらの機能を通じて、SAMD4Aは経路構成因子の翻訳を調節することで、増殖・分化・免疫関連シグナルの出力を司る経路に影響を与え得ます。SAMD4Aの制御異常は、がんに関連する遺伝子発現プログラムや、RNA代謝の破綻が疾患関連の細胞挙動に寄与する炎症性表現型の文脈で検討されてきました。

SAMD4A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSAMD4A遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SAMD4A内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SAMD4Aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SAMD4Aタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SAMD4Aシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SAMD4A欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SAMD4Aの機能に不可欠なSAMD4Aエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SAMD4Aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SAMD4A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSAMD4A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SAMD4A遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SAMD4A HDRプラスミド（h）および SAMD4A HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSAMD4Aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSAMD4A標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。