S-100 β chain CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400707

概要

S100Bは、S100ファミリーに属するカルシウム結合タンパク質であるS-100β鎖をコードしており、細胞内Ca2+シグナル伝達および細胞外の受容体介在性応答を、細胞状況（コンテキスト）に依存して調節します。S100Bは、細胞骨格ダイナミクス、細胞周期進行、酸化ストレス応答、炎症性シグナル伝達の制御に関与し、MAPK/ERKやNF-κBに連関するプロセスに影響を与える相互作用も含まれます。S-100βはアストロサイト生物学および神経炎症の分野で盛んに研究されており、その発現異常は神経損傷や神経変性疾患に加え、一部のがんにおける腫瘍微小環境シグナル伝達とも関連づけられています。これらの機能により、S100Bはグリア活性化状態、ストレスシグナル、ならびに細胞間コミュニケーション経路を解析するための有用な結節点（ノード）となります。

S-100 β chain CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるS100B遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、S100B内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、S100Bのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、S-100 β chainタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、S-100 β chainシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、S100B欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• S-100 β chainの機能に不可欠なS100Bエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、S100Bゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• S-100 β chain CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびS-100 β chain CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、S100B遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  S-100 β chain HDRプラスミド（h）および S-100 β chain HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはS100Bホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のS100B標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。