Plásmido Doble Nickase (h) RUFY4: sc-405000-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)RUFY4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa RUFY4 (h) y el plásmido de doble nickasa RUFY4 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RUFY4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) RUFY4 | sc-405000-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) RUFY4 | sc-405000-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RUFY4 (RUN and FYVE domain containing 4) codifica una proteína efectora que interactúa con GTPasas Rab, implicada en el tráfico de membranas endosomales y la maduración de vesículas. A través de su dominio RUN y de una región relacionada con FYVE que se une a fosfoinosítidos, RUFY4 se asocia con la coordinación del transporte vesicular, la dinámica del citoesqueleto y la organización espacial de complejos de señalización en contextos inmunitarios y epiteliales. Estudios de expresión y funcionales vinculan a RUFY4 con la regulación de pasos de tráfico adyacentes a la autofagia y con salidas de señalización inflamatoria que moldean las respuestas inmunitarias innatas. El transporte endolisosomal desregulado y el acoplamiento de vías inmunitarias en los que participa RUFY4 son relevantes para la investigación mecanística de la disfunción inmunitaria, la neuroinflamación y la adaptación al estrés de células cancerosas.
RUFY4 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RUFY4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RUFY4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RUFY4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RUFY4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.